黄芩苷标准品制备方法研究

    黄祖良1

    ,刘胜娟2

    (1. 右江民族医学院 ,广西 百色 533000 ; 2. 广西药科学校 ,广西 南宁 530023)

    摘要: 采用醇提酸沉法提取黄芩苷粗品 ,再用分步精制的方法来制备黄芩苷标准品 ,所得标准品的熔点、含量与对照标准

    品一致。提示:本法是制备黄芩苷标准品简便可行、收率高的方法。

    关键词: 黄芩苷;标准品;醇提酸沉法;工艺学 ,制药

    中图分类号: TQ460. 6 文献标识码: A 文章编号: 1001 - 5817 (2001) 04 - 0515 - 02

    黄芩苷(Baicalin)是中药黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)

    中具有抗菌作用的主要有效成分 ,是黄芩素 C7 位羟基与葡萄

    糖醛酸结合而成的苷[ 1 ]

    ,虽为己知化合物 ,但欲制取标准品较

    为困难 ,有关文献鲜见报道。文献[ 2 ]

    报道的制备方法采用水煮

    酸沉法提取黄芩苷粗品 ,收得率较低且粗品含量低在精制时需

    要多次重结晶 ,较为烦琐。笔者用醇提酸沉法提取黄芩苷粗品

    后再分步精制的方法来制备黄芩苷标准品 ,取得较为满意的效

    果。

    l 实验仪器与材料

    日本岛津LC - lOTVP液相色谱仪 ,WFlD检测器 ,CR - 6A

    数据处理机;XT - 4显微熔点测定仪。对照标准品:黄芩苷(含

    量测定用 ,中国药品生物制品检定所) ;除乙醇(工业用)外 ,其

    它所用化学试剂为分析纯。黄芩饮片购自百色市药材公司。

    2 实验部分

    2. 1 黄芩苷标准品的制取

    2. 1. 1 黄芩苷粗品的提取(采用醇提酸沉法) 黄芩饮片 60 ℃

    烘干 ,粉碎 ,以 60 %乙醇 15 倍量回流提取 2 次 ,每次 lh ,滤过 ,将提取液减压回收乙醇至尽后 ,用水将浓缩液调至原药材量的

    15 倍量左右 ,用浓 HCl调pH3～4 ,静置 lh 后滤去杂质 ,滤液再

    于 40 ℃调pH1. 5～2 ,保温 30min ,静置 24h 后抽滤。沉淀用蒸

    馏水洗涤至pH6. 5～7 ,再用 95 %乙醇洗涤 2～3 次 ,干燥即得

    黄芩苷粗品。

    2. 1. 2 黄芩苷的精制 取一定量研碎的黄芩苷粗品于回流提

    取器内 ,按 1∶ 10 加入蒸馏水 ,加热至 80 ℃时滴加 40 %NaOH调

    pH至 7. 5使粗品完全溶解 ,再用 HCl 调节 pH≈6 ,加乙醇至溶

    液含醇量为 60 %左右 ,过滤。滤液再用 HCl调pH≈1. 5～2 ,静

    置冷却至黄芩苷完全沉淀 ,过滤后干燥即得黄芩苷精品。

    2. 1. 3 黄芩苷的再精制 取一定量上述所制的黄芩苷精品装

    入滤纸筒中置于索氏提取器内 ,按 1∶ 100 的量加入甲醇 ,加热

    回流提取至索氏提取器中甲醇提取液颜色极浅为止 ,趁热抽

    滤。滤液减压浓缩至原体积的 2 5 ,迅速冷却 ,析出结晶 ,放置

    约 30min后过滤 ,用甲醇洗涤结晶 ,阴干。

    2. 1. 4 重结晶 用 1∶ 50 甲醇加热回流溶解重结晶一次便可

    得到淡黄色细针晶黄芩苷标准品。测熔点为 mp223～224 ℃

    (与标准品混合熔点不下降) 。

    2. 2 含量测定 参照文献[ 1 ]

    用 HPLC 法测定:色谱柱条件:

    CLC - ODS ,150mm×6. 0mm(日本岛津) ;流动相:甲醇 - 水 -

    磷酸(45∶ 53∶ 0. 2) ;检测波长:流速 1. 0ml min ;柱温:室温。对

    照品溶液的配制:精密称取在 60 ℃真空干燥 4h 的黄芩苷对照

    标准品 0. 0600g ,加甲醇溶解 ,定容 l000ml ,作为对照品溶液。

    供试品溶液的制备:精密称取试验所得黄芩苷 0. 3g ,加 80 %乙

    醇加热回流溶解至完全 ,放冷 ,转移至 l00ml 容量瓶中 ,加 80 %

    乙醇稀释至刻度 ,摇匀。从中精密量取 lml 置于 10ml 容量瓶

    中 ,加入甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即为供试品溶液。分别精密称

    取对照品溶液与供试品溶液各 10 μl ,注入液相色谱仪测定即

    得。实验结果见表 1 及表 2。

    表 1 两种提取方法结果比较(以 100g生药计)

    方法

    粗品

    重量

    (g)

    含量

    ( %)

    收率

    ( %)

    标准品

    重量

    (g)

    含量

    ( %)

    提取率

    ( %)

    总收率

    ( %)

    醇提酸沉法 5. 28 87. 35 4. 61 4. 35 99. 57 93. 95 4. 33

    水煮酸沉法 5. 56 76. 83 4. 27 3. 96 99. 42 92. 20 3. 93

    注:两种方法所得黄芩苷粗品均按本文方法精制黄芩苷标准

    品。

    表 2 本法、文献[ 2 ]

    法所得结晶与对照标准品比较

    方法

    比较项目

    黄芩苷含量

    ( %)

    熔点

    ( ℃)

    结晶性状

    对照标准品 99. 50 223～224 浅黄色细针晶

    本法得结晶 99. 57 223～224 浅黄色细针晶

    文献[ 2 ]

    - 1 99. 03 223～224 浅黄色针状晶

    文献[ 2 ]

    - 2 99. 47 223～224 浅黄色针状晶

    文献[ 2 ]

    - 3 99. 61 223～224 浅黄色细针晶

    注:表中文献[ 2 ]

    - 1 指该制法中的第一次重结晶 ,文献[ 2 ]

    - 2

    为该法中的第二次重结晶 ,文献[ 2 ]

    - 3 指该法中的第三次结晶 ......